TA的每日心情 | 慵懒 2024-12-19 22:24 |
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在现在的生化行业中,对于定量菌株的使用是非常广泛的,我们在使用它的时候不仅要保证使用正确的使用方法,还要保证进行试验时要注意很多事情,比如样品稀释、试剂盒平衡、样品和试剂的混匀、加样、洗板、以及操作要点等等几个方面。在文章中,小编就针对定量菌株的使用方法,以及使用它进行试验时的注意事项这两方面来给大家做一个详细的介绍。
定量菌株的使用方法:
1、用移液器或者注器取定量定量菌株的稀释液到装冻干球的瓶子中。
2、请将盛有定量菌株的瓶子放在漩涡混合器上混匀2分钟,使其溶解充分。
3、用移液器或者注册器吸取定量菌株的定量菌液,一般为01ml左右。
4、将01ml定量菌株的菌液均匀接种到待检培养基。
5、用玻璃棒将定量菌株的菌液均匀涂布在待检培养基表面。
6、晾干平皿,在恒温环境中培养,一定时间后取出观察计数。
使用定量菌株进行试验时的注意事项:
1、样品稀释
一般定量菌株的样品稀释倍数均通过大量试验确定,以保证试验的灵敏度和特异性。酶联免疫反应是一种敏感性很高的反应,如果血清不稀释,不可避免会产生很强的非特异性反应,出现假阳性。
2、试剂盒平衡
定量菌株应在试验前平衡至约25℃的室温,一般需在室温放置20-30分钟以上。平衡时间太短会造成试剂混匀不够,样品孵育时间相对缩短,反应不够充分。冬季室温低,可将试剂盒置37℃温箱20分钟。
3、样品和试剂的混匀
在对定量菌株稀释前、后的样品必须充分混匀,所有试剂在加样前也须摇匀,以保证试验的均一性。
4、加样
加样是一项很重要的步骤。加样不可太,要避免加在孔壁上部,不可溅出和产生气泡。加样太,法保证微量加样的准确性和均一性。加在孔壁上部的非包被区,易导致非特异吸附。
5、洗板
固相免疫测定技术是一种非均相免疫测定技术,需以洗涤操作将特异结合于固相的抗原或抗体与反应温育过程中吸附的非特异成份分离开来,以保证定量菌株测定的特异性。
6、操作要点
定量菌株洗液尽量不要溢出孔外;加洗液后要静置1分钟,甩去板孔中洗液后,一定要大力拍干;及时更换吸水纸,尤其是拍过酶标记物的吸水纸一定要弃去,否则可能影响试验结果。
综上所述,在看完文章之后,相信大家对于定量菌株的相关知识一定更了解了,如果大家想要了解更多的话,可以随时来咨询我们!
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